亚洲av日韩av无码,你日的我走不了路了,国产高潮国产高潮久久久,女人国产香蕉久久精品

您好,歡迎進(jìn)入上海莼試生物技術(shù)有限公司網(wǎng)站!
全國(guó)服務(wù)熱線(xiàn):13585831301
上海莼試生物技術(shù)有限公司
您現(xiàn)在的位置:首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 人食管癌組織源成纖維細(xì)胞培養(yǎng)步驟

人食管癌組織源成纖維細(xì)胞培養(yǎng)步驟

瀏覽次數(shù):963發(fā)布日期:2021-07-12

人食管癌組織源成纖維細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號(hào)11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號(hào)16000-044),15%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

Contact Us
  • 聯(lián)系QQ:3004972506
  • 聯(lián)系郵箱:sdfskdfhs3004972506@qq.com
  • 傳真:86-021-60443211
  • 聯(lián)系地址:上海嘉定區(qū)嘉羅公路1661

掃一掃  微信咨詢(xún)

©2024 上海莼試生物技術(shù)有限公司 版權(quán)所有  備案號(hào):滬ICP備17029297號(hào)-3  技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    GoogleSitemap    總訪問(wèn)量:104689 管理登陸

校草喝下春药被男生玩弄| 狂野欧美性猛交XXXX| 亚洲av无码精品色午夜| xxxx18一20岁hd| 欧美精产国品一二三区别| 高清播放器欧美大片| 老熟妇小伙子hd另类| 任我爽橹在线视频精欧美| 岛国AV无码一区二区三区| 久久精品一区二区三区中文字幕| 成人免费视频| 在线观看免费播放av片| 性xxxxfreexxxxxvideo| 日日日日做夜夜夜夜做无码| 真实的国产乱xxxx在线| 精品人伦一区二区三区蜜桃牛牛| 国产v综合v亚洲欧美久久| 麻豆精品一区二区综合AV| 国产AV一区二区精品凹凸| 国语自产偷拍精品视频偷| 十九岁日本完整免费完整版 | 70岁老太chinesebbw| 999热线在线观看| ...观看片免费人成视频| 亚洲欧美成人av在线观看| 美女黄网站永久免费观看网站| 狠狠色丁香婷婷综合| 花季传媒免费观看| 热の综合热の国产中文网| 在线观看免费视频| 国产精品无码一区二区在线观一| 丰满人妻在公车被猛烈进入电影| 哦┅┅快┅┅用力啊┅┅小说| 少妇放荡的呻吟干柴烈火| 国产精品美女久久久久| 按摩师舌头进去添的我好舒服| 日韩精品福利片午夜免费观着| 熟妇人妻无乱码中文字幕| 高潮时粗俗不堪入耳的话| 黑人猛挺进小莹的体内视频| 公与憩止痒小说400章|