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小鼠雜交瘤細(xì)胞;IIB11?培養(yǎng)操作規(guī)程

瀏覽次數(shù):817發(fā)布日期:2022-05-26

小鼠雜交瘤細(xì)胞;IIB11培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1)培養(yǎng)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。

二.細(xì)胞處理:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

中間絲家族孤啡肽2蛋白抗體

CD339抗體

連接粘附分子1抗體

活化蛋白激酶D抗體

Jun激活區(qū)域-連接蛋白1抗體

磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-2抗體

蛋白酪氨酸激酶JAK-3抗體

磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-3抗體

磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-3抗體

磷酸化原癌基因c-Jun抗體

蛋白質(zhì)酪氨酸激酶JAK2抗體

JWA蛋白抗體

連接蛋白JPH3抗體

連接粘附分子C抗體

蛋白質(zhì)酪氨酸激酶JAK-1抗體

組蛋白去甲基化酶JMJ2A抗體

組蛋白去甲基化酶JMJD5抗體

磷酸化γ連環(huán)蛋白抗體

JNK相互作用蛋白4抗體

氨基末端激酶1/2抗體


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